Efek dari diet Mediterania tradisional isoenergetic pada apolipoprotein AI kinetik pada pria dengan sindrom metabolik

Caroline Richard¹, Patrick Couture^1,2, Sophie Desroches¹, Alice H Lichtenstein³ and Benoît Lamarche^1*

AbstrakLatar belakang
Dampak dari diet Mediterania (MedDiet) pada high-density lipoprotein (HDL) kinetika belum diteliti sampai saat ini. Tujuan dari penelitian ini ialah untuk mengetahui pengaruh MedDiet dalam ketiadaan perubahan berat badan pada apolipoprotein (apo) AI kinetik pada pria dengan sindrom metabolik (Mets).Metode
Dua puluh enam pria dengan Mets (NCEP-ATP III) direkrut dari masyarakat umum. Dalam penelitian ini urutan tetap, diet peserta pertama distandardisasi untuk diet kontrol yang mencerminkan rata-rata saat ini dalam asupan makronutrien pada pria Amerika Utara, dengan semua makanan dan minuman yang disediakan di bawah kondisi isoenergetic selama 5 minggu. Peserta kemudian diberi sebuah MedDiet isoenergetic selama periode berikutnya 5 minggu untuk mempertahankan berat badan mereka konstan. Selama minggu terakhir setiap diet, peserta menerima satu dosis bolus [5,5,5-2H3] L-leusin dan sampel darah puasa dikumpulkan pada titik waktu yang telah ditentukan. ApoA-I kinetik ditentukan oleh pemodelan multicompartmental menggunakan data pengayaan isotop dari waktu ke waktu. Dan dianalisis menggunakan model CAMPURAN.Hasil
Tanggapan HDL-kolesterol (C) ke MedDiet adalah heterogen, sehingga tidak ada perubahan berarti dibandingkan dengan diet kontrol. Plasma apoA-I konsentrasi (-3.9%) dan ukuran kolam renang (-5.3%, keduanya P <0,05) secara signifikan lebih rendah setelah MedDiet dan laju produksi apoA-I cenderung berkurang (-5.7%, P = 0,07) dengan tidak ada perubahan di apoA-I katabolik tingkat pecahan (FCR, -1.6%, P = 0,64). Peserta di antaranya konsentrasi HDL-C meningkat dengan MedDiet (responden: berarti ΔHDL-C: 9,9 ± 3,2%, N = 11) menunjukkan penurunan yang signifikan di apoA-I FCR dan apoB dan sangat-low-density lipoprotein- trigliserida (VLDL-TG) konsentrasi (semua P <0,04) dibandingkan di antaranya tingkat HDL-C berkurang setelah MedDiet (non-penanggap: berarti ΔHDL-C: -12,0 ± 3,9%, N = 8). Analisis korelasi menunjukkan bahwa hanya variasi dalam apoA-I FCR (r = -0.48, P = 0,01) dan plasma VLDL-TG (r = -0.45, P = 0,03) konsentrasi yang berkorelasi dengan respon HDL-C individu yang MedDiet .Kesimpulan
Data dari studi ini makan terkontrol menunjukkan bahwa respon heterogen HDL-C untuk MedDiet, tanpa adanya penurunan berat badan yang penting, terutama terkait dengan variasi individu dalam apoA-I FCR dan plasma konsentrasi VLDL-TG.
MetodePopulasi dan desain penelitian
Rincian dari desain penelitian telah dijelaskan sebelumnya [6]. Secara singkat, 26 laki-laki (18-65 tahun) didiagnosis dengan Mets (NCEP-ATP III [1]), dan yang tidak merokok, yang tidak memiliki riwayat penyakit jantung koroner (PJK) atau diabetes tipe 2, dan tidak menggunakan lipid obat penurun atau anti-hipertensi direkrut untuk penelitian. Untuk dimasukkan dalam penelitian, pria juga harus memiliki berat badan yang stabil selama minimal 6 bulan sebelum awal penelitian, tidak menggunakan suplemen vitamin atau produk kesehatan alami, dan tidak memiliki keengganan untuk komponen tertentu dari MedDiet tersebut. Prosedur penelitian telah disetujui oleh Komite Etika Penelitian dari Laval University dan informed consent tertulis diperoleh dari semua peserta sebelum berpartisipasi dalam penelitian ini.Pakan Isoenergetic
Diet Peserta pertama distandardisasi untuk diet kontrol yang mencerminkan rata-rata saat ini dalam asupan makronutrien pada pria Amerika Utara [7]. Makanan diberikan dalam kondisi isoenergetic selama 5 minggu untuk menjaga berat tubuh yang konstan. Periode makan terkontrol termasuk dalam protokol untuk meminimalkan variasi antar-individu dikaitkan dengan diet setiap peserta biasa. Peserta kemudian diberikan dengan MedDiet (5 minggu) yang telah dirumuskan untuk menjadi sesuai dengan karakteristik dari pola makan Mediterania tradisional lagi dalam kondisi isoenergetic untuk menjaga berat tubuh yang konstan [8]. Menu tujuh-hari dan porsi harian berbagai kategori makanan untuk diet kontrol dan MedDiet ini dikembangkan untuk penelitian dan telah dijelaskan sebelumnya [6]. Berarti komposisi nutrisi dari diet kontrol dan MedDiet yang disajikan pada Tabel 1.
Tabel 1. Berarti komposisi nutrisi pakan kontrol dan MedDieta
Semua makanan, makanan dan minuman termasuk anggur merah yang diberikan kepada peserta di unit investigasi klinis (CIU) dari Institut Nutrisi dan Makanan Fungsional (INAF). Bagi kebanyakan pria, makan siang (40% dari asupan energi harian) dimakan di CIU dan makan malam dan sarapan di rumah. Laki-laki diperintahkan untuk hanya mengkonsumsi makanan yang disediakan dan melaporkan setiap penyimpangan dari protokol yang ditentukan pada daftar periksa. Penggunaan suplemen vitamin, obat anti-inflammatory drugs (NSAID) dan produk-produk kesehatan alami dilarang keras selama periode percobaan keseluruhan. Subjek diinstruksikan untuk mempertahankan tingkat aktivitas fisik mereka yang biasa kecuali untuk 3 hari yang mendahului periode pengambilan sampel darah, di mana mereka diminta untuk menahan diri dari latihan fisik yang intensif.Protokol Kinetic
Semua peserta menjalani studi kinetik selama minggu terakhir dari diet kontrol dan MedDiet tersebut. Pada setiap kesempatan setelah puasa 12-h, peserta menerima iv tunggal bolus [5,5,5-2H3] L-leusin (11 mg / kg) dan sampel darah puasa (20 mL) dikumpulkan pada titik waktu yang telah ditentukan selama periode 96 jam (0, 0,5, 1, 2, 4, 6, 8, 10 h). Dua belas jam sampel darah puasa Tambahan dikumpulkan di pagi hari dari 4 hari berikutnya berikutnya (24, 48, 72, 96 jam). Peserta tetap pada diet studi selama studi kinetik (5 hari).Lipid plasma dan penilaian lipoprotein
Lipid plasma diukur enzimatis pada Roche / Hitachi Modular menggunakan reagen Roche Diagnostics (Roche diagnostik GmbH, Mannheim, Jerman) sesuai dengan prosedur standar [9]. Kolesterol dan trigliserida isi HDL2 dan HDL3 subfraksi ditentukan setelah curah hujan berurutan dengan dekstran sulfat seperti yang dijelaskan sebelumnya [10]. Konsentrasi plasma apoA-I diukur dengan nephelometry (Dade Behring, Mississauga, Ontario, Kanada). Konsentrasi glukosa darah puasa ditentukan dengan metode dehidrogenase heksokinase-glukosa-6-fosfat [11] dan berpuasa konsentrasi insulin dengan radioimmunoassay [12].Kuantifikasi dan pengayaan isotop apolipoprotein AI
ApoA-I di d <1,25 g / ml fraksi plasma diperoleh dengan ultrasentrifugasi menggunakan Beckman 50.4ti Rotor. Sampel kemudian didialisis semalam di buffer NaCl-Tris-EDTA. Setelah pengobatan cysteamine selama 4 jam pada suhu 37 ° C, sampel delipidated sesuai dengan prosedur standar [13]. ApoA-I diisolasi dengan fokus yang isoelektrik (IEF) pada poliakrilamida-gel urea dan band yang dipotong. Band yang mengandung apoA-I kemudian dihidrolisis selama 24 jam pada 110 ° C menggunakan 6 N HCl, kering dan diderivatisasi. The isotop pengayaan (%) ditentukan oleh gas spektrometer kromatograf-massa (GC-MS, GC 6890 N, MS 5973 N, Agilent Technologies, Palo Alto, CA).Pemodelan Kinetic
ApoA-I pecahan katabolik rate (FCR) ditentukan dengan pemodelan multicompartmental dari data pengayaan isotop dari waktu ke waktu menggunakan perangkat lunak SAAM II (University of Washington, Departemen Bioengineering, Seattle, WA). Gambar 1 menunjukkan pengayaan isotop (%) dari waktu ke waktu dan model multicompartmental dari mana parameter kinetik berasal. Kompartemen 1-4 mencerminkan kinetik plasma leusin. Kompartemen 5 merupakan kolam intraselular leusin (hati dan jaringan lainnya) yang apoAI disintesis dan muncul ke dalam sirkulasi (kompartemen 7) setelah penundaan (kompartemen 6). Katabolik tingkat Fractional (renang / hari) plasma apoA-I diperoleh dari paling cocok pengayaan isotop apoA-I dari waktu ke waktu untuk model. Ukuran kolam renang (PS) dari apoA-I dihitung dengan mengalikan konsentrasi plasma apoA-I oleh volume plasma (diperkirakan 0.045 l / kg berat badan) [14]. Tingkat produksi (PR dalam mg / kg / d) dari apoA-I dihitung dengan mengalikan FCR oleh PS dari apoA-I, dan mengoreksi berat badan.
thumbnailFigure 1. Pengayaan isotop dari waktu ke waktu dan model yang multicompartmental digunakan untuk menurunkan apolipoprotein AI (apoAI) intravaskular kinetik. Berarti pengayaan isotop dari waktu ke waktu plasma apoA-I untuk 26 pria dengan Mets (simbol), model prediksi nilai (baris) dan model yang digunakan untuk multicompartmental ditentukan parameter kinetik apoA-I (insert). Kompartemen 1-4 mencerminkan kinetik plasma leusin. Kompartemen 5 merupakan kolam intraselular leusin (hati dan jaringan lainnya) yang apoAI disintesis dan muncul ke dalam sirkulasi (kompartemen 7) setelah penundaan (kompartemen 6).Analisis statistik
Data dilaporkan sebagai rata-rata ± SD dan persentase perubahan dari diet kontrol kecuali dinyatakan lain. Data dianalisis dengan menggunakan prosedur PROC MIXED untuk tindakan berulang di SAS dengan diet (MedDiet vs kontrol diet) sebagai efek diulang utama (v9.2, Cary, NC). Respon individu HDL-C untuk MedDiet adalah heterogen dan "responden" dan "non-penanggap" untuk MedDiet itu diidentifikasi berdasarkan perubahan sewenang-wenang didefinisikan dalam plasma HDL-C yang positif (≥ 0,05 mmol / L) atau negatif (≤ 0,05 mmol / L). Subyek yang variasi HDL-C yang mendekati 0 dikeluarkan untuk memaksimalkan perbedaan antara kelompok. Kedua kelompok dibandingkan dengan menggunakan non-parametrik Wilcoxon-Mann-Whitney sementara pasangan peringkat ditandatangani digunakan untuk menilai perubahan dalam kelompok. Pearson analisis korelasi univariat disesuaikan dengan usia yang digunakan untuk memeriksa hubungan antara diet-induced perubahan dalam HDL-C dan parameter lainnya. Variabel dengan distribusi miring yang log-10 diubah sebelum analisis statistik. Perbedaan pada P ≤ 0,05 (dua sisi) dianggap signifikan.

 

(Gebby Pratama Putri)